产品简介:
pCMV-N-Myc是上海华潍自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-Myc质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
Myc tag 679–708
multiple cloning site 711–784
T7 promoter and T7 primer binding site 827–848
SV40 polyA signal 860–1243
f1 origin of ss-DNA replication 1381–1687
bla promoter 1712–1836
SV40 promoter 1856–2194
neomycin/kanamycin resistance ORF 2229–3020
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3021–3479
pUC origin 3608–4275
pCMV-N-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:
Myc tag
SacI M E Q K L I S E E
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGGA GCAGAAACTC ATCTCTGAAG
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACCT CGTCTTTGAG TAGAGACTTC
XmaI PstI
D L SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI
701 AGGATCTGAG CCCGGGCGGA TCCAAGCTTC TGCAGGAATT CGATATCGTC
TCCTAGACTC GGGCCCGCCT AGGTTCGAAG ACGTCCTTAA GCTATAGCAG
BglII XhoI XbaI SpeI ApaI KpnI
751 GACAGATCTC TCGAGTCTAG AACTAGTGGG CCCGGTACCT TAATTAATTA
CTGTCTAGAG AGCTCAGATC TTGATCACCC GGGCCATGGA ATTAATTAAT
pCMV-N-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Myc)包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I
PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I
Spl I Xca I
pCMV-N-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Myc once)包括:
Nde I CA`TA,TG 241 |
Apa I G,GGCC`C 783 |
pCMV-N-Myc质粒中对于插入片断进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列
如下:
T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(827-848): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-Myc的全序列信息: PHWE4533 pCMV-N-Myc-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。