产品简介:
pNFκB-luc(报告基因质粒)是上海华潍自行研发的用于检测NFκB转录活性水平的报告基因质粒。
pNFκB-luc是以上海华潍的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个NFκB结合位点,可以高灵敏度地检测NFκB的激活水平。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pNFκB-luc质粒的主要信息如下:
Base pairs 5610
NFκB response element (κB) 26-65
luc2 reporter gene 111-1763
SV40 late poly(A) signal 1798-2019
SV40 early enhancer/promoter 2067-2485
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 2510-3304
Synthetic poly(A) signal 3329-3377
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3444-3463
ColE1-derived plasmid replication origin 3701
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4492-5352
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5457-5610
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5559-5578
pNFκB-luc的多克隆位点及NFκB response element的详细图谱如下:
BglI KpnI NheI NFkB response elememt
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCGGGAA TTTCCGGGAA TTTCCGGGAA
CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGCCCTT AAAGGCCCTT AAAGGCCCTT
BglII HindIII
51 TTTCCGGGAA TTTCCAGATC TGCAGAAGCT TGGCAATCCG GTACTGTTGG
AAAGGCCCTT AAAGGTCTAG ACGTCTTCGA ACCGTTAGGC CATGACAACC
pNFκB-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pNFκB-luc))包括:
Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nru I PaeR7 I
PflM I Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sac I Sma I
SnaB I Spl I Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xho I Xma I
pNFκB-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pNFκB-luc once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 |
BstB I TT`CG,AA 3380 |
pNFκB-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3(5559-5578):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pNFκB-luc的全序列信息:PHWE3983-pNFkappaB-luc-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。