4.2.12 基因过表达及基因沉默实验
【生物背景】
基因过表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子。生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。同一基因在不同组织能生成不同的基因产物来源于不同组织的类似蛋白,可以由同一基因编码产生,这种现象首先是由于基因中的增强子等有组织特异性,它能与不同组织中的组织特异因子结合,故在不同组织中同一基因会产生不同的转录物与转录后加工作用。
基因沉默可特异性地导致mRNA的降解,特异性地抑制mRNA的翻译,所用的mRNA可以来自体内或体外。RNA沉默是一种由双链RNA诱导同源RNA降解的现象,是植物的一种天然抗病毒机制。但是由于长期的共进化过程,一些病毒会在siRNA沉默途径以及miRNA沉默途径中编码一些抑制蛋白来对抗这种机制,使其作用受到抑制。文章对RNA沉默的发现、过程、抑制及其由RNA沉默介导的对RNA病毒、DNA病毒的抗性、以及由转病毒基因介导的病毒抗性等几种植物抗病机制。同时,对研究中所存在的一些问题作了分析,并RNA沉默被认为是一种基于核酸的有效的免疫系统。事实上。一些细胞能够识别非必须的入侵外源核酸.之后通过形成21-25个核苷酸长度的核酸介导这些入侵的外源核酸的降解。 许多植物和动物病毒通过编码抑制蛋白阻断宿主的RNA沉默进程,这一阻断作用发生在siRNA沉默途径以及大部分的miRNA沉默途径中的各个阶段。
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基因过表达及基因沉默实验 |
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