产品简介:
pISRE-TA-luc(报告基因质粒)是上海华潍自行研发的用于检测ISRE转录活性水平的报告基因质粒。
pISRE-TA-luc是以上海华潍的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个ISRE结合位点,可以高灵敏度地检测ISRE的激活水平。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pISRE-TA-luc质粒的主要信息如下:
Base pairs 5671
ISRE response element 26-85
Minimal TA promoter (pTA) 108-130
luc2 reporter gene 172-1824
SV40 late poly(A) signal 1859-2080
SV40 early enhancer/promoter 2128-2546
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 2571-3365
Synthetic poly(A) signal 3390-3438
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3505-3524
ColE1-derived plasmid replication origin 3762
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4553-5413
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5518-5671
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5620-5639
pISRE-TA-luc的多克隆位点及ISRE response element的详细图谱如下:
BglI KpnI NheI ISRE response element
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCGAAAC TGAAACTGAA ACTGAAACTG
CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGCTTTG ACTTTGACTT TGACTTTGAC
BglII HindIII
51 AAACTGAAAC TGAAACTGAA ACTGAAACTG AAACTAGATC TGCAGAAGCT
TTTGACTTTG ACTTTGACTT TGACTTTGAC TTTGATCTAG ACGTCTTCGA
Minimal TA promoter
101 TAGACACTAG AGGGTATA
ATCTGTGATC TCCCATAT
pISRE-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pISRE-TA-luc)包括:
Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nru I PaeR7 I
PflM I Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sac I Sma I
SnaB I Spl I Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xho I
pISRE-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pISRE-TA-luc once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 |
BstB I TT`CG,AA 3441 |
pISRE-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3 (5620-5639):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pISRE-TA-luc的全序列信息:PHWE3956 pISRE-TA-luc-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。