3.4.9 泛素相关抑制剂分子水平筛选
【生物背景】
泛素化信号通路,在第一步反应中,泛素活化酶(又被称为E1)水解ATP并 将一个泛素分子腺苷酸化。接着,泛素被转移到E1的活性中心的半胱氨酸 残基上,并伴随着第二个泛素分子的腺苷酸化。被腺苷酸化的泛素分子接 着被转移到第二个酶,泛素交联酶(E2)的半觥氨酸残基上。最后,高度 保守的泛素连接酶(E3)家族中的一员(根据底物蛋白质的不同而不同)识别特定的需要被泛素化的靶蛋白,并催化泛素分子从E2上转移到靶蛋白 上。靶蛋白在被蛋白酶体识别之前,必须被标记上至少四个泛素单体分子 (以多泛素链的形式)。因此,是E3使得这一系统具有了底物特异性。E1 、E2和E3蛋白的数量依赖于生物体和细胞类型,人体中就存在大量不同的 E3蛋白,这说明泛素-蛋白酶体系统可以作用于数量巨大的靶蛋白。最终, 被标记的蛋白质被蛋白酶分解为较小的多肽、氨基酸以及可以重复使用的泛素。
【筛选项目】
【筛选价格】
针对所有靶点的分子水平筛选报价相同;
周期:2-3周;
送样量:2-3 mg;
(1)一个化合物检测一个靶点的IC50值(9个浓度计算IC50值):990元人民币。(至少3个化合物起测)
(2)一个化合物检测一个靶点的单浓度抑制率:240元人民币(至少10个化合物起测)
(3)一个化合物检测一个靶点的双浓度抑制率:340元人民币(至少8个化合物起测)
(4)一个化合物检测全酶谱筛选:一个靶点IC50值990元人民币(周期4-8周,1个化合物起测,至少测5个靶点)
注1:每个测试浓度都用双复孔,阳性药免费;
注2:TR-FRET原理的相关实验,在以上价格的基础上再增加20%;
【结果示例】