产品简介：

    pCMV-N-Flag是上海华潍自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Flag标签的序列，因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-N-Flag质粒的主要信息如下：
    Feature Nucleotide                                 Position
    CMV promoter                                       1–602
    T3 promoter and T3 primer binding site             620–639
    Flag tag                                           679–702
    multiple cloning site                              705–778
    T7 promoter and T7 primer binding site             821–842
    SV40 polyA signal                                  854–1237
    f1 origin of ss-DNA replication                    1375–1681
    bla promoter                                       1706–1830
    SV40 promoter                                      1850–2188
    neomycin/kanamycin resistance ORF                  2223–3014
    HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal               3015–3473
    pUC origin                                         3602–4269
       pCMV-N-Flag的多克隆位点的详细图谱如下：
                                              Flag tag        
        SacI                       M  D   Y  K  D   D  D  D  K
    651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGGA TTACAAGGAT GACGACGATA
        CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACCT AATGTTCCTA CTGCTGCTAT
            XmaI                 PstI 
            SmaI    BamHI HindIII      EcoRI  EcoRV SalI   BglII
    701 AGAGCCCGGG CGGATCCAAG CTTCTGCAGG AATTCGATAT CGTCGACAGA
        TCTCGGGCCC GCCTAGGTTC GAAGACGTCC TTAAGCTATA GCAGCTGTCT
           XhoI  XbaI          ApaI
    751 TCTCTCGAGT CTAGAACTAG TGGGCCCGGT ACCTTAATTA ATTAAGGTAC
        AGAGAGCTCA GATCTTGATC ACCCGGGCCA TGGAATTAAT TAATTCCATG
    pCMV-N-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括：
    Afl II    Age I    Ahd I       Asc I     Bbs I    Bbv II      Blp I
    Bsg I     BsiW I   BsmB I      BspM II   BsrG I   BssH II     Bst1107 I
    BstE II   Ear I    Eco47 III   Eco72 I   EcoN I   Esp I       Fse I
    Nru I     PflM I   Pme I       Pml I     PpuM I   Psp1406 I   Sap I
    Sca I     Spl I 
    pCMV-N-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括：

    pCMV-N-Flag质粒中对于插入片断进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
    T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
    T7 primer(821-842): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
    pCMV-N-Flag的全序列信息： PHWE4499 pCMV-N-Flag-seq.txt