产品简介:
pAAT-promoter-luc(报告基因质粒)是上海华潍自行研发的用于检测AAT promoter转录活性水平的报告基因质粒。
pAAT-promoter-luc是以上海华潍的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human AAT的启动子序
列,可以高灵敏度地检测AAT promoter的激活水平。
AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase,也简称为A1AT),又称serine peptidase
inhibitor,clade A,member 1或serine proteinase inhibitor,clade A,member 1(简称SERPINA1),是一种可以被分泌到细胞外的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷时会导致肺气肿(emphysema)或肝脏疾病等。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pAAT-promoter-luc质粒的主要信息如下:
Base pairs 6445
AAT promoter 20-900
luc2 reporter gene 946-2598
SV40 late poly(A) signal 2633-2854
SV40 early enhancer/promoter 2902-3320
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 3345-4139
Synthetic poly(A) signal 4164-4212
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 4279-4298
ColE1-derived plasmid replication origin 4536
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 5327-6187
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 6292-6445
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 6394-6413
pAAT-promoter-luc的多克隆位点及AAT-promoter的详细图谱如下:
BglI KpnI AAT promoter BamHI
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCT TCCCTGGTCT GAATGTGTGT GCTGGAGGAT
CCGGATTGAC CGGCCATGGA AGGGACCAGA CTTACACACA CGACCTCCTA
51 CCTGTGGGTC ACTCGCCTGG TAGAGCCCCA AGGTGGAGGC ATAAATGGGA
GGACACCCAG TGAGCGGACC ATCTCGGGGT TCCACCTCCG TATTTACCCT
101 CTGGTGAATG ACAGAAGGGG CAAAAATGCA CTCATCCATT CACTCTGCAA
GACCACTTAC TGTCTTCCCC GTTTTTACGT GAGTAGGTAA GTGAGACGTT
151 GTATCTACGG CACGTACGCC AGCTCCCAAG CAGGTTTGCG GGTTGCACAG
CATAGATGCC GTGCATGCGG TCGAGGGTTC GTCCAAACGC CCAACGTGTC
ApaI
201 CGGGCGATGC AATCTGATTT AGGCTTTTAA AGGGATTGCA ATCAAGTGGG
GCCCGCTACG TTAGACTAAA TCCGAAAATT TCCCTAACGT TAGTTCACCC
251 GCCCCACTAG CCTCAACCCT GTACCTCCCC TCCCCTCCAC CCCCAGCAGT
CGGGGTGATC GGAGTTGGGA CATGGAGGGG AGGGGAGGTG GGGGTCGTCA
StuI
301 CTCCAAAGGC CTCCAACAAC CCCAGAGTGG GGGCCATGTA TCCAAAGAAA
GAGGTTTCCG GAGGTTGTTG GGGTCTCACC CCCGGTACAT AGGTTTCTTT
351 CTCCAAGCTG TATATGGATC ACACTGGTTT TCCAGGAGCA AAAACAGAAA
GAGGTTCGAC ATATACCTAG TGTGACCAAA AGGTCCTCGT TTTTGTCTTT
401 CAGGCCTGAG GCTGGTCAAA ATTGAACCTC CTCCTGCTCT GAGCAGCCTG
GTCCGGACTC CGACCAGTTT TAACTTGGAG GAGGACGAGA CTCGTCGGAC
451 GGGGGCAGAC TAAGCAGAGG GCTGTGCAGA CCCACATAAA GAGCCTACTG
CCCCCGTCTG ATTCGTCTCC CGACACGTCT GGGTGTATTT CTCGGATGAC
501 TGTGCCAGGC ACTTCACCCG AGGCACTTCA CAAGCATGCT TGGGAATGAA
ACACGGTCCG TGAAGTGGGC TCCGTGAAGT GTTCGTACGA ACCCTTACTT
551 ACTTCCAACT CTTTGGGATG CAGGTGAAAC AGTTCCTGGT TCAGAGAGGT
TGAAGGTTGA GAAACCCTAC GTCCACTTTG TCAAGGACCA AGTCTCTCCA
601 GAAGCGGCCT GCCTGAGGCA GCACAGCTCT TCTTTACAGA TGTGCTTCCC
CTTCGCCGGA CGGACTCCGT CGTGTCGAGA AGAAATGTCT ACACGAAGGG
651 CACCTCTACC CTGTCTCACG GCCCCCCATG CCAGCCTGAC GGTTGTGTCT
GTGGAGATGG GACAGAGTGC CGGGGGGTAC GGTCGGACTG CCAACACAGA
701 GCCTCAGTCA TGCTCCATTT TTCCATCGGG ACCATCAAGA GGGTGTTTGT
CGGAGTCAGT ACGAGGTAAA AAGGTAGCCC TGGTAGTTCT CCCACAAACA
751 GTCTAAGGCT GACTGGGTAA CTTTGGATGA GCGGTCTCTC CGCTCTGAGC
CAGATTCCGA CTGACCCATT GAAACCTACT CGCCAGAGAG GCGAGACTCG
801 CTGTTTCCTC ATCTGTCAAA TGGGCTCTAA CCCACTCTGA TCTCCCAGGG
GACAAAGGAG TAGACAGTTT ACCCGAGATT GGGTGAGACT AGAGGGTCCC
851 CGGCAGTAAG TCTTCAGCAT CAGGCATTTT GGGGTGACTC AGTAAATGGT
GCCGTCATTC AGAAGTCGTA GTCCGTAAAA CCCCACTGAG TCATTTACCA
BglII HindIII
901 AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT GTTGGTAAAG CCACCATGGA
TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA CAACCATTTC GGTGGTACCT
pAAT-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pAAT-promoter-luc)包括:
Aat II Afl II Asc I Ase I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I
Nde I Nhe I Nru I PaeR7 I PflM I
Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II
Sac I Sma I SnaB I Srf I Tth111 I
pAAT-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pAAT-promoter-luc once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 |
Mun I C`AATT,G 2773 |
pAAT-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3 (6394-6413):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pAAT-promoter-luc的全序列信息: PHWE4083 pAAT-promoter-luc-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。