产品简介:
Caspase 9 活性检测试剂盒(Caspase 9 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 9酶活性或纯化的caspase 9酶活性的试剂盒。
Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 9也称ICE-LAP6或Mch6,有时被写作caspase-9或caspase 9,是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个caspase。线粒体释放细胞色素c以后,caspase 9可以和细胞色素c以及Apaf1形成复合物,同时被激活。激活的caspase 9可以激活细胞凋亡的最关键酶caspase 3,从而促进后续的细胞凋亡信号。Caspase 9的激活可以通过磷酸化进行调控。
本Caspase 9活性检测试剂盒是基于caspase 9可以催化底物Ac-LEHD-pNA(acetyl-Leu-Glu-His-Asp
p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 9的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 9催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 9酶活性的标准品。
本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测100个样品。
保存条件:
-20℃保存,Ac-LEHD-pNA和pNA需避光保存。
注意事项:
须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405,如有困难可以测定A400。
Ac-LEHD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。
测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(PHWQ0013),可向上海华潍订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
本试剂盒的裂解液可以和上海华潍生产的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用,即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于上海华潍其它caspase活性检测试剂盒的检测。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。