产品简介:
上海华潍的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(Membrane and Cytosol Protein Extraction
Kit)提供
了一种比较简单、方便地从培养细胞或组织中抽提细胞膜蛋白和细胞浆蛋白的方法。抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的膜蛋白,也包括线粒体膜、内质网膜和高尔基体膜等上的膜蛋白。
本试剂盒通过匀浆适度破碎细胞,经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀,随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清,然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。
约90分钟即可完成培养细胞或组织的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白的分离和抽提。抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE,Western、酶活性测定等后续实验。
膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等,后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定,但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。
本试剂盒按照本说明书的操作步骤可以抽提100个细胞或组织样品。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
需自备PMSF。PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失
效。PMSF(PHWTU683)可以向上海华潍订购。
使用本试剂盒抽提到的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白均可直接用上海华潍生产的BCA法蛋白浓度测定试剂盒
(PHWQ0016/PHWQ0027/PHWQ0027T/PHWQ0028/PHWQ0029/PHWQ0029T)测定蛋白浓度。抽提获得的细胞膜蛋白不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。