产品简介:
上海华潍生产的Beyozol是一种用于细胞或组织总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的
TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。
Beyozol的颜色和TRIzol相同,加入氯仿后上层呈无色,下层呈紫红色,便于吸取上层水相。
Beyozol对动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提均适用。
Beyozol可以抽提长达15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。
Beyozol抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。
裂解细胞或和组织共匀浆时,Beyozol可以保持样品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。
每一百万细胞用Beyozol抽提可得5-15µg RNA;每毫克组织用Beyozol抽提可得1-10µg RNA。产量因细胞和组织不同而异。 抽提两个样品约需一小时。
Beyozol抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
上海华潍生产的Beyozol(PHWS0028)和Trizol(PHWS0033)的成分有细微差别,实际抽提效果无任何显著差异。
每100ml Beyozol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。
保存条件:
4℃保存,一年有效。
注意事项:
需自备氯仿,异丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC(PHWTU053),DEPC水(PHWS0038)可向上海华潍订购。
所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐先加入适量Beyozol,并裂解样品后冻存。
必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
Beyozol含有毒物质苯酚,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Beyozol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
Beyozol抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步骤进行操作。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。