产品简介:
上海华潍生产的抗酒石酸酸性磷酸酶检测试剂盒(Tartrate Resistant Acid Phosphatase
Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的抗酒石酸酸性磷酸酯酶活性的试剂盒。
酸性磷酸酶(Acid Phosphatase),也称酸性磷酸酯酶,在酸性条件下可以催化磷酸酯键的水解。酸性磷酸酶是一个蛋白家族,哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。酸性磷酸酶主要分为两类,一类为抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,
TRAP),一类为抗氟离子酸性磷酸酶。
抗酒石酸酸性磷酸酶是一种糖基化的含金属蛋白酶,在破骨细胞(osteoclast)和破软骨细胞(chondroclast)中高表达。在活化的巨噬细胞和神经元中也有表达。抗酒石酸酸性磷酸酶在细胞信号转导、细胞增殖和分化等方面起重要作用,也和活性氧产生和铁离子转运等有关。抗酒石酸酸性磷酸酶可以被破骨细胞释放到血液中,几乎被认为是是机体破骨活性的唯一血液指标。
在一些疾病状态下,如白血病性网状内皮组织增生症(leukaemic
reticuloendotheliosis)、戈谢病(Gaucher’s disease)、艾滋病导致的脑病(HIV-induced encephalopathy)、破骨细胞瘤(osteoclastoma)、骨质疏松(osteoporosis)和代谢性骨疾病(metabolic bone disease)有关。TRAP敲除小鼠有轻微的骨骼石化症,TRAP转基因小鼠有轻微的骨质疏松。
本试剂盒可以检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液或纯化的酶样品等中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性。
Para-nitrophenyl
phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下,呈黄色产物,可以在400-415nm检测吸光度。产物黄色越深,说明酸性磷酸酶检活性越高,反之则酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。在适量的酒石酸存在的情况下进行酸性磷酸酶的活性检测,检测得到的酸性磷酸酶活性就是抗酒石酸酸性磷酸酶活性。
包括标准品和空白对照,本试剂盒共可进行120个样品的检测。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。显色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事项:
如果希望进行酶活性的绝对定量,进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育30分钟等较长的时间,以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高,则可以预先适当稀释样品。
样品溶液中须避免出现各种酸性磷酸酶抑制剂。
一管显色底物配制后需当日使用完毕,因此请注意适当多准备一些样品一起检测,以避免试剂盒浪费。
p-nitrophenol溶液对人体有害,请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性,请小心操作。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。