产品简介:
NF-κB激活-核转运检测试剂盒(NF-κB Activation,Nuclear Translocation Assay Kit)是通过免疫荧光染色检测NF-κB的主要亚基p65是否转运到细胞核内从而确认NF-κB是否被激活的检测试剂盒。本试剂盒中的NF-κB p65抗体可以识别人、小鼠或大鼠的NF-κB p65亚基,因此本试剂盒可以检测人、小鼠或大鼠细胞或组织中的NF-κB核转运激活。
本试剂盒提供了固定液、洗涤液、封闭液、一抗、荧光标记二抗、细胞核荧光染色液、封片液,使用时不必再配制其它任何溶液。提供了细胞核荧光染色液,可以把细胞核染成蓝色荧光,这样可以清楚地判断NF-κB是否被转运到细胞核内而被激活。
NF-κB是一种常见的转录因子,可以被炎症因子、生长因子或趋化因子等激活。常见的炎症因子(包括Interleukin-1和TNF-α等)都可以激活NF-κB。NF-κB由两类亚基形成同源或异源二聚体。一类亚基包括p65(也称RelA)、RelB和C-Rel;另一类亚基包括p50和p52。最常见的NF-κB亚基组成形式为p65/p50或p65/p65。
NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物,分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情况下,IκB-α会在Ser32和Ser36被磷酸化,随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后,其核定位序列被暴露,从而被转运到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。通过免疫染色检测NF-κB的主要亚基p65是否被转移到细胞核内,就可以判断NF-κB是否被激活。
本NF-κB激活-核转运检测试剂盒仅染色p65,不染色RelB、C-Rel、p50和p52。
使用本试剂盒染色后NF-κB呈红色荧光,细胞核呈蓝色荧光。
如果检测组织切片或6孔板内的细胞样品,至少可以检测50个样品,如果检测96孔板内的样品,至少可以检测250-500个样品。
保存条件:
细胞核染色液-20℃保存,其余试剂均4℃保存,半年有效。其中抗兔Cy3和细胞核染色液需避光保存。
注意事项:
免疫荧光染色时,请注意回收使用过的NF-κB p65抗体和抗兔Cy3。回收后至少可以重复使用10次。
需使用可以观察红色荧光和蓝色荧光的荧光显微镜。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。