产品简介:
pCMV-C-Myc是上海华潍自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-Myc质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
multiple cloning site 680-740
c-Myc tag 741-770
T7 promoter and T7 primer binding site 823–844
SV40 polyA signal 856–1239
f1 origin of ss-DNA replication 1377–1681
bla promoter 1706–1830
SV40 promoter 1850–2188
neomycin/kanamycin resistance ORF 2223–3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3015–3473
pUC origin 3602–4269
pCMV-C-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:
XmaI PstI
SacI SmaI BamHI HindIII
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
Myc
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI E Q K L
701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA GAGCAGAAAC
CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT CTCGTCTTTG
tag
I S E E D L ApaI
751 TCATCTCTGA AGAGGATCTG TAAGGGCCCG GTACCTTAAT TAATTAAGGT
AGTAGAGACT TCTCCTAGAC ATTCCCGGGC CATGGAATTA ATTAATTCCA
pCMV-C-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Myc)包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I
PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I
Spe I Spl I
pCMV-C-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Myc once)包括:
Nde I CA`TA,TG 241 |
Pvu I CG,AT`CG 857 |
pCMV-C-Myc质粒中对于插入片断进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(823-844): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-C-Myc的全序列信息: PHWE4449 pCMV-C-Myc-seq.txt