产品简介:
pRL-SV40-N(报告基因质粒)是上海华潍自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bgl II位点切除SV40 early enhancer/promoter,以降低本底性的转录,并插入感兴趣的5’-UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究3’-UTR并希望使用海肾荧光素酶时,推荐使用PHWE4545 pRL-SV40-C。
pRL-SV40-N质粒含有SV40早期增强子和启动子,可以实现海肾荧光素酶在哺乳动物细胞内的高效表达。
pRL-SV40-N质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾荧光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检测。
本质粒为氨苄抗性。
pRL-SV40-N质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide Position
SV40 early enhancer/promoter 7-418
Multiple cloning site 421-480
Chimeric intron 546-682
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) 726-744
T7 RNA polymerase transcription initiation site 743
Rluc reporter gene 754-1689
SV40 late polyadenylation signal 1731-1932
β-lactamase (Ampr) coding region 2079-2939
pRL-SV40-N的多克隆位点的详细图谱如下:
EcoRI
XhoI SacI MluI HindIII EcoRV
411 TTTTGCAAAA AGCTCCTCGA GGAGCTCACG CGTAAGCTTG AATTCGATAT
AAAACGTTTT TCGAGGAGCT CCTCGAGTGC GCATTCGAAC TTAAGCTATA
SalI SpeI ApaI
461 CGTCGACACT AGTGGGCCCC AGCTTGATTC TTCTGACACA ACAGTCTCGA
GCAGCTGTGA TCACCCGGGG TCGAACTAAG AAGACTGTGT TGTCAGAGCT
pRL-SV40-N中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-N)包括:
AatII AgeI AscI BbeI BlpI BsgI BsiWI
BsmBI BspMII BssHII Bst1107I BstEII BstXI Bsu36I
DraIII Eco47III Eco72I EheI EspI FseI KasI
MscI NaeI NarI NdeI NgoMI NruI PflMI
PmeI PmlI PpuMI PspAI RsrII SacII SapI
SmaI SnaBI SplI SrfI Tth111I
pRL-SV40-N中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-N once)包括:
BglII A`GATC,T 1 |
XcmI CCANNNN,N`NNNNTGG 1403 |
pRL-SV40-N质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 Primer(726-744): TAATACGACTCACTATAGG
pRL-SV40-N的全序列信息: PHWE4539 pRL-SV40-N-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。