产品简介:
pCMV-Blank是上海华潍自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-Blank质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
multiple cloning site 680–753
T7 promoter and T7 primer binding site 796–817
SV40 polyA signal 829–1212
f1 origin of ss-DNA replication 1350–1654
bla promoter 1679–1803
SV40 promoter 1823–2161
neomycin/kanamycin resistance ORF 2196–2987
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 2988–3446
pUC origin 3575–4242
pCMV-Blank的多克隆位点的详细图谱如下:
XmaI PstI
SacI SmaI BamHI HindIII
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI ApaI
701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA ACTAGTGGGC
CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT TGATCACCCG
KpnI KpnI
751 CCGGTACCTT AATTAATTAA GGTACCAGGT AAGTGTACCC AATTCGCCCT
GGCCATGGAA TTAATTAATT CCATGGTCCA TTCACATGGG TTAAGCGGGA
pCMV-Blank中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-Blank)包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I
Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I
Sca I Spl I
pCMV-Blank中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-Blank once)包括:
Nde I CA`TA,TG 241 |
Pvu I CG,AT`CG 830 |
pCMV-Blank质粒中对于插入片断进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列
如下:
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(796-817): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-Blank的全序列信息: PHWE4379 pCMV-Blank-seq.txt