产品简介:
pTNF-α-promoter-luc(报告基因质粒)是上海华潍自行研发的用于检测TNF-α promoter转录活性水平的报告基因质粒。
pTNF-α-promoter-luc是以上海华潍的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human TNF-α的启动
子序列(-991bp~+1bp),可以高灵敏度地检测human TNF-α promoter的激活水平。
TNF-α(Tumor Necrosis Factor α),中文名为肿瘤坏死因子α,是一种非常重要的炎性细胞因
子,在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pTNF-α-promoter-luc质粒的主要信息如下:
Base pairs 6555
hTNF-α promoter 20-1010
luc2 reporter gene 1056-2708
SV40 late poly(A)signal 2743-2964
SV40 early enhancer/promoter 3012-3430
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region 3455-4249
Synthetic poly(A)signal 4274-4322
Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region 4389-4408
ColE1-derived plasmid replication origin 4646
Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region 5437-6297
Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site 6402-6555
Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region 6504-6523
pTNF-α-promoter-luc的多克隆位点及TNF-α promoter的详细图谱如下:
BglI KpnI TNF-α promoter
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCA GCTCCTGGGA GATATGGCCA CATGTAGCGG
CCGGATTGAC CGGCCATGGT CGAGGACCCT CTATACCGGT GTACATCGCC
51 CTCTGAGGAA TGGGTTACAG GAGACCTCTG GGGAGATGTG ACCACAGCAA
GAGACTCCTT ACCCAATGTC CTCTGGAGAC CCCTCTACAC TGGTGTCGTT
101 TGGGTAGGAG AATGTCCAGG GCTATGGAAG TCGAGTATGG GGACCCCCCC
ACCCATCCTC TTACAGGTCC CGATACCTTC AGCTCATACC CCTGGGGGGG
151 TTAACGAAGA CAGGGCCATG TAGAGGGCCC CAGGGAGTGA AAGAGCCTCC
AATTGCTTCT GTCCCGGTAC ATCTCCCGGG GTCCCTCACT TTCTCGGAGG
201 AGGACCTCCA GGTATGGAAT ACAGGGGACG TTTAAGAAGA TATGGCCACA
TCCTGGAGGT CCATACCTTA TGTCCCCTGC AAATTCTTCT ATACCGGTGT
251 CACTGGGGCC CTGAGAAGTG AGAGCTTCAT GAAAAAAATC AGGGACCCCA
GTGACCCCGG GACTCTTCAC TCTCGAAGTA CTTTTTTTAG TCCCTGGGGT
301 GAGTTCCTTG GAAGCCAAGA CTGAAACCAG CATTATGAGT CTCCGGGTCA
CTCAAGGAAC CTTCGGTTCT GACTTTGGTC GTAATACTCA GAGGCCCAGT
EcoRI XmaI/SmaI
351 GAATGAAAGA AGAAGGCCTG CCCCAGTGGG GTCTGTGAAT TCCCGGGGGT
CTTACTTTCT TCTTCCGGAC GGGGTCACCC CAGACACTTA AGGGCCCCCA
XmaI/SmaI
401 GATTTCACTC CCCGGGGCTG TCCCAGGCTT GTCCCTGCTA CCCCCACCCA
CTAAAGTGAG GGGCCCCGAC AGGGTCCGAA CAGGGACGAT GGGGGTGGGT
451 GCCTTTCCTG AGGCCTCAAG CCTGCCACCA AGCCCCCAGC TCCTTCTCCC
CGGAAAGGAC TCCGGAGTTC GGACGGTGGT TCGGGGGTCG AGGAAGAGGG
501 CGCAGGGACC CAAACACAGG CCTCAGGACT CAACACAGCT TTTCCCTCCA
GCGTCCCTGG GTTTGTGTCC GGAGTCCTGA GTTGTGTCGA AAAGGGAGGT
551 ACCCCGTTTT CTCTCCCTCA AGGACTCAGC TTTCTGAAGC CCCTCCCAGT
TGGGGCAAAA GAGAGGGAGT TCCTGAGTCG AAAGACTTCG GGGAGGGTCA
601 TCTAGTTCTA TCTTTTTCCT GCATCCTGTC TGGAAGTTAG AAGGAAACAG
AGATCAAGAT AGAAAAAGGA CGTAGGACAG ACCTTCAATC TTCCTTTGTC
651 GCCACAGACC TGGTCCCCAA AAGAAATGGA GGCAATAGGT TTTGAGGGGC
CGGTGTCTGG ACCAGGGGTT TTCTTTACCT CCGTTATCCA AAACTCCCCG
701 ATGGGGACGG GGTTCAGCCT CCAGGGTCCT ACACACAAAT CAGTCAGTGG
TACCCCTGCC CCAAGTCGGA GGTCCCAGGA TGTGTGTTTA GTCAGTCACC
751 CCCAGAAGAC CCCCCTCGGA ATCGGAGCAG GGAGGATGGG GAGTGTGAGG
GGGTCTTCTG GGGGGAGCCT TAGCCTCGTC CCTCCTACCC CTCACACTCC
801 GGTATCCTTG ATGCTTGTGT GTCCCCAACT TTCCAAATCC CCGCCCCCGC
CCATAGGAAC TACGAACACA CAGGGGTTGA AAGGTTTAGG GGCGGGGGCG
851 GATGGAGAAG AAACCGAGAC AGAAGGTGCA GGGCCCACTA CCGCTTCCTC
CTACCTCTTC TTTGGCTCTG TCTTCCACGT CCCGGGTGAT GGCGAAGGAG
SacI
901 CAGATGAGCT CATGGGTTTC TCCACCAAGG AAGTTTTCCG CTGGTTGAAT
GTCTACTCGA GTACCCAAAG AGGTGGTTCC TTCAAAAGGC GACCAACTTA
951 GATTCTTTCC CCGCCCTCCT CTCGCCCCAG GGACATATAA AGGCAGTTGT
CTAAGAAAGG GGCGGGAGGA GAGCGGGGTC CCTGTATATT TCCGTCAACA
PstI
-1 BglII HindIII
1001 TGGCACACCC AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT GTTGGTAAAG
ACCGTGTGGG TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA CAACCATTTC
pTNF-α-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pTNF-α-promoter-luc)包括:
Aat II Afl II Asc I Ase I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR V Mlu I Nde I Nhe I Nru I
PaeR7 I Pme I Pml I Psp1406 I Rsr II SnaB I Spl I
Srf I Vsp I Xcm I Xho I
pTNF-α-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut ppTNF-α-promoter-luc once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 |
EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3930 |
pTNF-α-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3(6504-6523):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pTNF-α-promoter-luc的全序列信息: PHWE4257-pTNF-α-promoter-luc-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。