产品简介:
pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)是上海华潍自行研发的用于检测IL-6 promoter转录活性水平的报告基因质粒。
pIL-6-promoter-luc是以上海华潍的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human IL-6的启动子序
列(-637bp~+53bp),可以高灵敏度地检测IL-6 promoter的激活水平。
IL-6(Interleukin-6),中文名为白细胞介素-6,简称白介素6,是一种非常重要的炎性细胞因子,
在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pIL-6-promoter-luc质粒的主要信息如下:
Base pairs 6252
IL-6 promoter 20-707
luc2 reporter gene 753-2405
SV40 late poly(A) signal 2440-2661
SV40 early enhancer/promoter 2709-3127
Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region 3152-3946
Synthetic poly(A) signal 3971-4019
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 4086-4105
ColE1-derived plasmid replication origin 4343
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 5134-5994
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 6099-6252
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 6201-6220
pIL-6-promoter-luc的多克隆位点及IL-6 promoter的详细图谱如下:
BglI KpnI IL-6 promoter
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCT GGAGACGCCT TGAAGTAACT GCACGAAATT
CCGGATTGAC CGGCCATGGA CCTCTGCGGA ACTTCATTGA CGTGCTTTAA
51 TGAGGGTGGC CAGGCAGTTC TACAACAGCC GCTCACAGGG AGAGCCAGAA
ACTCCCACCG GTCCGTCAAG ATGTTGTCGG CGAGTGTCCC TCTCGGTCTT
101 CACAGAAGAA CTCAGATGAC TGGTAGTATT ACCTTCTTCA TAATCCCAGG
GTGTCTTCTT GAGTCTACTG ACCATCATAA TGGAAGAAGT ATTAGGGTCC
151 CTTGGGGGGC TGCGATGGAG TCAGAGGAAA CTCAGTTCAG AACATCTTTG
GAACCCCCCG ACGCTACCTC AGTCTCCTTT GAGTCAAGTC TTGTAGAAAC
201 GTTTTTACAA ATACAAATTA ACTGGAACGC TAAATTCTAG CCTGTTAATC
CAAAAATGTT TATGTTTAAT TGACCTTGCG ATTTAAGATC GGACAATTAG
251 TGGTCACTGA AAAAAAAAAT TTTTTTTTTT CAAAAACCAT AGCTTTAGCT
ACCAGTGACT TTTTTTTTTA AAAAAAAAAA GTTTTTGGTA TCGAAATCGA
301 TATTTTTTTT CTCTTTGTAA AACTTCGTGC ATGACTTCAG CTTTACTCTT
ATAAAAAAAA GAGAAACATT TTGAAGCACG TACTGAAGTC GAAATGAGAA
351 TGTCAAGACA TGCCAAAGTG CTGAGTCACT AATAAAAGAA AAAAAGAAAG
ACAGTTCTGT ACGGTTTCAC GACTCAGTGA TTATTTTCTT TTTTTCTTTC
NheI
401 TAAAGGAAGA GTGGTTCTGC TTCTTAGCGC TAGCCTCAAT GACGACCTAA
ATTTCCTTCT CACCAAGACG AAGAATCGCG ATCGGAGTTA CTGCTGGATT
451 GCTGCACTTT TCCCCCTAGT TGTGTCTTGC GATGCTAAAG GACGTCACAT
CGACGTGAAA AGGGGGATCA ACACAGAACG CTACGATTTC CTGCAGTGTA
501 TGCACAATCT TAATAAGGTT TCCAATCAGC CCCACCCGCT CTGGCCCCAC
ACGTGTTAGA ATTATTCCAA AGGTTAGTCG GGGTGGGCGA GACCGGGGTG
551 CCTCACCCTC CAACAAAGAT TTATCAAATG TGGGATTTTC CCATGAGTCT
GGAGTGGGAG GTTGTTTCTA AATAGTTTAC ACCCTAAAAG GGTACTCAGA
TATA box
601 CAATATTAGA GTCTCAACCC CCAATAAATA TAGGACTGGA GATGTCTGAG
GTTATAATCT CAGAGTTGGG GGTTATTTAT ATCCTGACCT CTACAGACTC
+1
651 GCTCATTCTG CCCTCGAGCC CACCGGGAAC GAAAGAGAAG CTCTATCTCC
CGAGTAAGAC GGGAGCTCGG GTGGCCCTTG CTTTCTCTTC GAGATAGAGG
BglII HindIII
701 CCTCCAGAGA TCTGCAGAAG CTTGGCAATC CGGTACTGTT GGTAAAGCCA
GGAGGTCTCT AGACGTCTTC GAACCGTTAG GCCATGACAA CCATTTCGGT
pIL-6-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pIL-6-promoter-luc)包括:
Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II BssH II
Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nru I PflM I Pme I
Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sac I Sma I SnaB I Spl I
Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xma I Xmn I
pIL-6-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pIL-6-promoter-luc once)包括:
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 |
Asp718 G`GTAC,C 15 |
pIL-6-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3(6201-6220):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pIL-6-promoter-luc的全序列信息: PHWE4163 pIL-6-promoter-luc-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经上海华潍书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。